Inoculation des boîtes de gélose

L'inoculation d'une boîte de Pétri coulée avec des boutures de champignons frais est une méthode utilisée pour propager le mycélium à partir des tissus des champignons. Voici un guide étape par étape sur la façon d'inoculer une boîte de Pétri avec des boutures de champignons frais :

Les matériaux nécessaires:

• Boîte de Pétri stérile avec milieu gélose
• Corps ou tissu fructifère de champignon frais
• Scalpel stérile ou lame de rasoir
• Gants stériles
• Lampe à alcool ou bec Bunsen
• Environnement de travail stérile (par exemple, hotte à flux laminaire ou boîte à gants)
• Parafilm ou ruban micropore
• Étiquettes et marqueur

Procédure:

1. Préparez votre environnement de travail :

   • Travaillez dans un environnement propre et stérile, comme une hotte à flux laminaire ou une boîte à gants. Stérilisez votre zone de travail et votre équipement à l'aide d'une lampe à alcool ou d'un bec Bunsen.

2. Sélectionnez une fructification de champignon saine :

   • Choisissez une fructification de champignon mature et saine. Assurez-vous qu’il ne présente aucun signe de contamination ou de pourriture.

3. Préparez la coupe de champignons :

   • Stérilisez un scalpel ou une lame de rasoir en le passant dans une flamme jusqu'à ce qu'il soit rouge, puis laissez-le refroidir. Coupez une petite section du tissu du champignon dans la partie interne du corps fructifère. Ce tissu doit contenir du mycélium.

4. Inoculer la boîte de Pétri :

   • Ouvrez la boîte de Pétri stérile dans votre espace de travail stérile. Soulevez légèrement le couvercle pour exposer le milieu gélosé. Placez délicatement la coupe de champignon sur la gélose, en vous assurant qu'elle entre en contact avec la surface. Fermez immédiatement le plat pour éviter toute contamination.

5. Étiquetez et scellez la boîte de Pétri :

   • Étiquetez la boîte de Pétri avec la date, le type de champignon et toute autre information pertinente. Utilisez du Parafilm ou du ruban micropore pour sceller la boîte de Pétri sur les bords afin d’éviter toute contamination.

6. Incuber la boîte de Pétri :

   • Placez la boîte de Pétri scellée dans un incubateur réglé à la température appropriée pour votre espèce de champignon. La croissance du mycélium prend généralement plusieurs semaines. La température varie en fonction des espèces de champignons spécifiques avec lesquelles vous travaillez.

7. Surveiller la croissance :

   • Vérifiez périodiquement la boîte de Pétri pour détecter tout signe de croissance du mycélium. Vous verrez une croissance blanche et duveteuse provenant de la bouture du champignon.

L'inoculation d'une boîte de Pétri avec des boutures de champignons frais est un processus précis qui nécessite des conditions stériles pour éviter toute contamination. En suivant ces étapes, vous pouvez propager avec succès le mycélium de champignon à partir de tissus frais pour des expérimentations et une culture ultérieures.